PCR反应体系
组成要素 主要由寡核苷酸(引物)、Taq DNA 聚合酶、dNTP、靶序列DNA 和PCR 反应缓冲液体系这五组成分组成。 ① 引物 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其 …
分享基因检测基本理论、方法原理和临床意义,并提供基因检测实验室的仪器设备使用常识、相关实验操作基本规范。
组成要素 主要由寡核苷酸(引物)、Taq DNA 聚合酶、dNTP、靶序列DNA 和PCR 反应缓冲液体系这五组成分组成。 ① 引物 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其 …
定义 聚合酶链式反应是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制,PCR的最大特点,是能将微量的DNA大幅增加。 工作原理 1.DNA变性(90℃-96℃):双链DNA模板在热作用下,氢键断裂,形成单链DNA。 2.退 …
易感基因是指在适宜的环境刺激下能够编码遗传性疾病或获得疾病易感性的基因。发现了这些基因,深入研究,从而有效地预防和控制遗传疾病的发生。
第三代测序技术是指单分子测序技术。DNA测序时,不需要经过PCR扩增,实现了对每一条DNA分子的单独测序。第三代测序技术也叫从头测序技术,即单分子实时DNA测序。
STR (Short Tandem Repeat)短串联重复序列又称微卫星DNA,是一类广泛存在于人类基因组中的DNA多态性基因座。它由2~6个碱基对构成核心序列,呈串联重复排列,长度50-100bp。其产生机制主要是DNA复制过程中滑动,或复制和修复时滑动链与互补链碱基错配, …
气溶胶(aerosol)由固体或液体小质点分散并悬浮在气体介质中形成的胶体分散体系,又称气体分散体系。其分散相为固体或液体小质点,其大小为0.001~100μm,分散介质为气体。
第一代DNA测序技术用的是1975年由桑格(Sanger)和考尔森(Coulson)开创的链终止法或者是1976-1977年由马克西姆(Maxam)和吉尔伯特(Gilbert)发明的化学法(链降解).在2001年,完成的首个人类基因组图谱就是以改进了的Sanger法为其测序基础。Sanger法 …
一、焦磷酸测序(pyrosequencing)介绍 焦磷酸测序技术是由4种酶催化的同一反应体系中的酶级联化学发光反应。焦磷酸测序法适于对已知的短序列的测序分析,其可重复性和精确性能与SangerDNA测序法相媲美,而速度却大大的提高。焦磷酸测序能够提供定量的实 …
单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphisms)简称SNP SNP主要是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性。它是人类可遗传的变异中最常见的一种。占所有已知多态性的90%以上。SNP在人类基因组中广泛存在,平均每500~1000个碱基 …
探针是能与特异靶分子反应并带有供反应后检测的合适标记物的分子。 核酸探针是指带有标记物的一小段已知序列的单链DNA或者RNA片段(大约是20到500bp),用于检测与其互补的核酸序列。 寡核苷酸探针(oligonucleotide probe) 是人工合成的由短链核苷 …
1、一代测序结果 测序公司发送的测序结果一般有一个峰图文件和一个序列文件,峰图文件为ABI格式,用chromas软件(网上可下载)打开。峰图用四种颜色的波形代表四种碱基的信号强度;正常的峰图,波峰与波谷清晰,峰与峰之间的距离均匀;比较理想的测序 …
高通量测序技术(High-throughputsequencing,HTS)是对传统Sanger测序(称为一代测序技术)革命性的改变, 以能一次并行对几十万到几百万条DNA分子进行序列测定和一般读长较短等为标志。