第一代DNA测序技术用的是1975年由桑格(Sanger)和考尔森(Coulson)开创的链终止法或者是1976-1977年由马克西姆(Maxam)和吉尔伯特(Gilbert)发明的化学法(链降解).在2001年,完成的首个人类基因组图谱就是以改进了的Sanger法为其测序基础。Sanger法主要利用了双脱氧核苷酸会终止PCR的原理。
Sanger法核心原理是:由于ddNTP的2’和3’都不含羟基,其在DNA的合成过程中不能形成磷酸二酯键,因此可以用来中断DNA合成反应;在4个DNA合成反应体系中分别加入一定比例带有放射性同位素标记的ddNTP(分为:ddATP,ddCTP,ddGTP和ddTTP),通过凝胶电泳和放射自显影后可以根据电泳带的位置确定待测分子的DNA序列。
一代测序的特点:速度快,但是一次只能测一条单一的序列,且最长也就能测1000-1500bp,准确性高达99.999%,但测序成本高,通量低。
ABi一代测序仪 3130XL、3130、3730XL、3100、3100 Avant、3500、3500XL、3700;