探针

探针是能与特异靶分子反应并带有供反应后检测的合适标记物的分子。

核酸探针是指带有标记物的一小段已知序列的单链DNA或者RNA片段(大约是20到500bp),用于检测与其互补的核酸序列。

寡核苷酸探针(oligonucleotide probe) 是人工合成的由短链核苷酸组成的大分子(即一段比较短的DNA或者RNA),而且这些分子(短链)被进行适当的标记,能够与被检测的长链DNA或RNA(例如目的DNA)的一小部分互补结合,因而能够用于探测、鉴定长链核苷酸。

TaqMan荧光探针是一种寡核苷酸探针,荧光基团连接在探针的5’末端,而淬灭剂则在3’末端,中间是能与靶基因特异性结合的序列。PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。

                                

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