MOI：是“Multiplicity of Infection”的缩写，中文为感染复数或者复感染指数，含义为感染时病毒和细胞数量的比值。
因为MOI与细胞、细胞代数、细胞状态等都有关系，所以，一般做正式实验前都需要安排预实验，以了解细胞所需MOI以及病毒对细胞状态和传代的影响。
1、实验前保证细胞的良好生长状态，实验前一天接种3~5×103个目的细胞于96孔培养板中，所加培养基体积为90 µL，一次实验需要20个孔。分盘时，一般不用边上的孔。因为Lentivirus表达时间较慢，所以一般在三到四天后观察荧光，故在进行感染实验时细胞接种不宜过密（细胞的融合率约为30～50 %左右）。
2、感染预实验共分为两组不同感染条件，每组均有三个不同梯度的MOI。第一组为正常培养基中直接加病毒感染，也就是说在完全培养基中直接加入病毒；第二组加病毒同时在培养基中添加5ug/mL的polybrene。
3、实验开始，准备2个无菌的1.5 mL Ep管，在每个管中加入45 µL的常觃培养基，吸取5 µL的1×108TU/mL的病毒(预先从-80℃取出在冰上融化)加入到第一个管中，轻柔混匀，勿使产生泡沫。同样从第一管中吸取5 µL的病毒到第二个管中，混匀。于是第一个管中的病毒滴度为1×107 TU/mL，而第二个管中的滴度为1×106 TU/mL。如果病毒原液的滴度并不是1×108 TU/mL，则取一部分可以加常规培养基稀释使这成为1×108 TU/mL，将剩余分装冻回。
4、另取一个Ep管，取2 µL Polybrene稀释到400 µL。使用时在设置了添加Polybrene的孔中加入稀释后的Polybrene 10 µL，由于最后的体积为100 µL，所以Polybrene相当于被稀释了2000倍，最后的浓度为5 µg/mL。
5、先将10 µL三个不同梯度的病毒加到各组的相应孔中。加入的病毒量分别为1×106 TU，1×105 TU，1×104 TU，而细胞经过生长，此时细胞的数目大约为1×104个，所以三个孔的MOI分别为100、10、1。
6、在设定需要添加Polybrene的孔中加入10 µL的Polybrene稀释液。
7、在水平方向轻轻拍打培养板，使培养基和病毒等试剂充分混匀，然后把细胞板放回培养箱孵育。
8、培养8~12 h以后观察细胞状态，弃去细胞上清，更换为新鲜培养基。
9、感染3~4天后，观察荧光表达情况。对于生长缓慢代谢慢的细胞，可以适当延长观察时间，中途可以换液，保持细胞的活性。
10、通过细胞感染效果，确认目的细胞的感染条件和感染参数。
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