贴壁细胞MTT实验操作：
1、接种细胞：收集对数期实验细胞，调整细胞悬液浓度（1×104~11×105个/ml），每孔接种100ul细胞悬液（每孔细胞数量103~104个/孔）。通常只选择中间60孔用作实验，边缘孔用无菌PBS填充（当然也可以用细胞培养基，只是有点浪费）。
2、加药处理：5%CO2，37℃孵育至细胞贴壁后即可加药，通常我们选择在前一天下午种96孔板，次日上午加药处理细胞。一般设5-7个药物梯度（用完全培养基配置2×稀释液），每孔100ul药物稀释液；每个梯度（组）设3-5个复孔，建议设5个。
3、5%CO2，37℃细胞培养箱孵育16-48小时（按实验需要选择）。
4、每孔加入20ulMTT溶液（5mg/ml，即0.5%MTT），继续37℃细胞培养箱孵育4h（若药物与MTT能够反应，可先弃去孔内培养液，小心用PBS冲2-3遍后，再加入含MTT的培养液）。
5、终止培养，小心吸去孔内培养液（通常我们选择一次性甩去孔内培养液）。
6、每孔加入150ul二甲基亚砜，振荡２min，使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪检测OD492nm/570nm各孔的吸光度值。
7、特别说明：实验应同时设置调零孔（培养基、MTT、二甲基亚砜），对照孔（细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、二甲基亚砜）
悬浮细胞MTT实验操作：
悬浮细胞MTT实验操作与贴壁细胞基本相同，只是第5步终止培养，去孔内培养液是应先用酶标板离心机4000rpm离心5~10min（如果没有也可以想其他替代办法）。
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